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細胞學(xué)堂 | 培養基顏色改變意味著(zhù)什么

更新時(shí)間:2023-04-28  |  點(diǎn)擊率:2355


細胞培養過(guò)程中,培養基的顏色變化往往對應著(zhù)細胞狀態(tài)。大多數情況下,我們所見(jiàn)的培養基都呈紅色,這是因為細胞培養基的PH值大多在7.4左右,添加了酚紅的培養基的顏色就是紅色。不同成分培養基的顏色會(huì )有差異,例如DMEM會(huì )比1640顏色深一點(diǎn),主要是DMEM里面的酚紅含量比1640多導致。當然還有部分培養基不含有酚紅,呈現的就是無(wú)色或者淡黃色。


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圖1:DMEM培養基正常顏色


很多時(shí)候,培養基顏色并不是我們所見(jiàn)的紅色,而是偏紫或偏黃,不同顏色培養基究竟對應何種細胞狀態(tài)呢?本期細胞學(xué)堂將為您揭曉培養基顏色變化的原因。




培養基顏色偏紅或者紫




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圖2:使用了一段時(shí)間后的培養基顏色偏深


開(kāi)封了一段時(shí)間后的培養基,顏色會(huì )比正常深很多,如上圖。主要是因為大部分細胞培養基所用的緩沖體系為NaHCO3,培養基開(kāi)封后NaHCO3會(huì )分解成CO2溢出,導致培養基偏堿;可以將培養瓶擰松放置于CO2培養箱中一段時(shí)間后,培養基顏色會(huì )變正常。





顏色變深的培養基能不能繼續使用?


部分細胞能夠很快適應培養基的這種PH值波動(dòng),放入培養箱后可以正常生長(cháng);也有極少數的細胞會(huì )比較敏感,造成細胞漂浮過(guò)多等情況,如BV2細胞會(huì )就比較敏感,可能出現漂浮增多的情況。


Tips:建議配好完-全培養基后,分裝到50mL離心管,并于一周內用完,量少時(shí)放到15mL離心管里保存。




培養基顏色變黃




通常培養基里的酚紅指示劑遇酸會(huì )變黃,但也有可能是細胞被污染而導致的培養基顏色變黃,以下為幾種常見(jiàn)情況:


#1

由于細胞代謝產(chǎn)酸,培養了細胞后的培養基會(huì )從紅變黃,如果培養基是橘黃色,則是細胞健康生長(cháng)的顏色,無(wú)須擔心,繼續培養即可。


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圖3:培養細胞后的培養基顏色


#2

若細胞狀態(tài)良好,但換液后培養基顏色變黃快,則可能是因為細胞密度大或消耗過(guò)大,提示需要傳代了。

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圖4:培養基快消耗完時(shí)的顏色


#3

若細胞狀態(tài)差,生長(cháng)異常,培養基很快變黃,變渾濁,鏡下觀(guān)察有較多小顆粒物,則有可能是細菌污染(如圖5)或支原體污染。輕度污染可用抗生素清洗處理或使用支原體清除試劑,重度污染建議消殺后丟棄。


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圖5:細菌污染時(shí)培養基顏色






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